Apéndice 1 — NOM-003-SEMARNAT-1997, Que establece los límites máximos permisibles de contaminantes para las aguas residuales tratadas que se reusen en servicios al público.

ANEXO 1

TECNICA PARA LA DETERMINACION Y CUANTIFICACION DE HUEVOS DE HELMINTO

1. Objetivo

Determinar y cuantificar huevos de helminto en lodos, afluentes y efluentes tratados.

2. Campo de aplicación

Es aplicable para la cuantificación de huevos de helminto en muestras de lodos, afluentes y efluentes de

plantas de tratamiento.

3. Definiciones

3.1 Helminto: término designado a un amplio grupo de organismos que incluye a todos los gusanos

parásitos (de humanos, animales y vegetales) y de vida libre, con formas y tamaños variados.

3.2 Platyhelmintos: gusano dorsoventralmente aplan ado, algunos de interés médico son: Taenia solium,

Hymenolepis nana e II. diminuta, entre otros.

3.3 Nematelmintos: gusanos de cuerpo alargado y forma cilíndrica. Algunas especies enteroparásitas de

humanos y animales son: Ascaris lumbricoides , Toxocara canis, Enterobius vermicularis y Trichuris trichiura ,

entre otros.

3.4 Método difásico: técnica de concentración que utiliza la combinación de dos reactivos no miscibles y

donde las partículas (huevos, detritus), se orientan en función de su balance hidrofílico-lipofílico.

3.5 Método de flotación: técnica de concentración donde las partículas de interés permanecen en la

superficie de soluciones cuya densidad es mayor. Por ejemplo, la densidad de huevos de helminto se

encuentra entre 1.05 a 1.18, mientras que los líquidos de flotación se sitúan entre 1.1 a 1.4.

4. Fundamento

Utiliza la combinación de los principios del método difásico y del método de flotació n, obteniendo un

rendimiento de un 90%, a partir de muestras artificiales contaminadas con huevos de helminto de ascaris.

5. Equipo

Centrífuga: con intervalos de operación de 1,000 a 2,500 revoluciones por minuto

Periodos de operación de 1 a 3 minutos

Temperatura de operación 20 a 28 ºC

Bomba de vacío: adaptada para control de velocidad de succión 1/3 hp

Microscopio óptico: con iluminación Köheler

Aumentos de 10 a 100X; platina móvil; sistema de microfotografía

Agitador de tubos: automático, adaptable con control de velocidad

Parrilla eléctrica: con agitación

Hidrómetro: con intervalo de medición de 1.1 a 1.4 g/cm3

Temperatura de operación: 0 a 4ºC

6. Reactivos

- Sulfato de zinc heptahidratado

- Acido sulfúrico

- Eter etílico

- Etanol

- Agua destilada

- Formaldehído

6.1 Solución de sulfato de zinc, gravedad específica de 1.3

- Fórmula

- Sulfato de zinc 800 g

- Agua destilada 1,000 ml

PREPARACION

Disolver 800 g de sulfato de zinc en 1,000 ml de agua destilada y agitar en la parrilla eléctrica hasta

homogeneizar, medir la densidad con hidrómetro. Para lograr la densidad deseada agregar reactivo o agua,

según sea el caso.

6.2 Solución de alcohol-ácido

- Fórmula

- Acido sulfúrico 0.1 N 650 ml

- Etanol 350 ml

PREPARACION

Homogeneizar 650 ml del ácido sulfúrico al 0.1 N, con 350 ml del etanol para obtener un litro de la solución

alcohol-ácida. Almacenarla en recipiente hermético.

7. Material

- Garrafones de 8 litros

- Tamiz de 160 mm (micras) de poro

- Probetas graduadas (1 litro y 50 ml)

- Gradillas para tubos de centrífuga de 50 ml

- Pipetas de 10 ml de plástico

- Aplicadores de madera

- Recipientes de plástico de 2 litros

- Guantes de plástico

- Vasos de precipitado de 1 litro

- Bulbo de goma

- Magneto

- Cámara de conteo Doncaster

- Celda Sedgwich-Rafter

8. Condiciones de la muestra

1 Se transportarán al laboratorio en hieleras con bolsas refrigerantes o bolsas de hielo.

2 Los tiempos de conservación en refrigeración y transporte deben reducirse al mínimo.

3 Si no es posible refrigerar la muestra líquida, d ebe fijarse con 10 ml de formaldehído al 4% o

procesarse dentro de las 48 horas de su toma.

4 Una muestra sólida debe refrigerarse y procesarse en el menor tiempo posible.

9. Interferencias

La sobreposición de estructuras y/o del detritus no eliminado en e l sedimento, puede dificultar su lectura,

en especial cuando se trata de muestras de lodo. En tal caso, es importante dividir el volumen en alícuotas

que se consideren adecuadas.