Numeral 8.5.2 — NOM-194-SSA1-2004, Productos y servicios. Especificaciones sanitarias en los establecimientos dedicados al sacrificio y faenado de animales para abasto, almacenamiento, transporte y expendio. Especificaciones sanitarias de productos

8.5.2 Método de prueba para el diagnóstico de Trichinella spiralis en estado de larva desenquistada

i) Principio del método.

Se basa en un proceso de digestión artificial con agitación magnética, en una solución de pepsina y

solución de ácido clorhídrico concentrado en proporción de 1:19 en la que el jugo gástrico digiere eficazmente

el tejido muscular y la membrana del quiste, permitiendo la liberación de las larvas del parásito.

ii) Equipo.

Parrilla eléctrica con agitación magnética.

Microscopio estereoscópico con aumentos de 50 a 100X.

Balanza granataria o analítica de 0,1 g de precisión.

Picadora de carne o licuadora.

iii) Materiales.

Pinzas de diente de ratón.

Tijeras.

Termómetro.

Vaso de precipitados de 150 ml

Matraz Erlenmeyer 250 ml.

Tubos de centrífuga de 40 ml

Caja Petri de 19 x 100 mm

Pipetas Pasteur de cauda corta.

Bulbos de goma de una onza o gotero.

Mallas de 35, 2 mm de abertura.

iv) Reactivos.

Los reactivos que a continuación se mencionan deben ser de grado analítico y por agua debe entenderse

agua destilada.

Pepsina granulada de 1:10,000

Acido clorhídrico (HCl) concentrado

v) Procedimiento.

v.1 Medir 100 ml de agua en un vaso de precipitados y calentar a una temperatura de 37°C con agitación

constante.

v.2 Agregar 1,0 g de pepsina y 0,8 ml de solución de ácido clorhídrico al 25%.

v.3 Adicionar la muestra bien picada.

v.4 Tapar el vaso con papel aluminio.

v.5 Dejar agitando vigorosamente durante 30 min, manteniendo a una temperatura de 37°C.

v.6 Después de 30 min, verter la solución de la digestión a través de la malla de 2 mm de abertura,

recibiendo en un vaso de precipitados.

v.7 Deje reposar la solución de digestión filtrada, durante 30 min.

v.8 Decantar el sobrenadante y colocar el sedimento en un tubo de centrífuga. Suspender el sedimento en

varios volúmenes de agua. Repetir este procedimiento hasta que el sobrenadante sea claro.

v.9 Verter el sedimento final en una caja petri y observa r bajo un microscopio estereoscópico. Examinar la

presencia o ausencia de larvas.

Nota: En caso de utilizar pepsina con mayor actividad se debe guardar la proporción.

vi) Expresión de resultados.

Ausencia o presencia de Trichinella sp.

8.6 Clenbuterol, se debe aplicar el método de ensayo inmuno enzimático.