Numeral 9.2.1 — NOM-089-SSA1-1994, Bienes y Servicios. Métodos para la determinación del contenido microbiano en productos de belleza.

9.2.1 Procedimiento

Preparar un frotis con microorganismos provenientes de un cultivo de 24 -48 horas de incubación.

Aplicar calor suave al portaobjetos con la llama de un mechero o de una lámpa ra de alcohol de manera

paulatina. El calentamiento no debe ser excesivo ni violento. Enfriar y aplicar sobre el frotis unas gotas de

solución de cristal violeta, dejar actuar un minuto. Lavar con agua y escurrir. Aplicar unas gotas de la

solución yodo -yodurada con mordente, dejar actuar un minuto. Lavar con agua y escurrir. Decolorar el frotis

con unas gotas de la solución alcohol -acetona, durante no más de 10 segundos. Lavar con agua y escurrir.

Aplicar unas gotas de la solución de safranina, dejar actuar entre 15 y 30 segundos. Lavar con agua,

inclinar el portaobjeto para dejar escurrir el exceso de agua y secar los bordes con papel secante.

9.2.2 Interpretación de resultados. Observar al microscopio con objetivo de inmersión.

Las bacterias Gram positivas, se observan teñidas de color azul violáceo intenso.

Las Gram negativas se observan de color rojo.

9.3 Identificación de S. aureus. En caso de encontrar cocos en racimo Gram positivos, continuar con las siguientes pruebas para

búsqueda de S. aureus.